ПОСТИЖЕНИЯ ПРИ ПРИЛАГАНЕ МЕТОДА “CHROMOSOME WALKING” ЗА ЛОКУСА НА ГЕНА RF1, ВЪЗСТАНОВИТЕЛ НА ФЕРТИЛНОСТТА ПРИ СЛЪНЧОГЛЕДА
Миглена Друмева1, Ренате Хорн2
1- Добруджански земеделски институт - гр. Генерал Тошево 2 - Institut für Biowissenschaften, Pflanzengenetik, Universität Rostock, Albert-Einstein-Str. 3, 18051 Rostock, Germany
Резюме
Търговските сортове при слънчогледа (Helianthus annuus L.) представляват хибриди, създадени въз основа на цитоплазмената мъжка стерилност (ЦМС). От 1969 г. до днес в хетерозисната селекция на слънчогледа се използва PET1- цитоплазма (Leclerq, 1969), която произхожда от междувидовата кръстоска - H. petiolaris х H. annuus. Молекулярните проучвания върху Rf1- гена, който възстановява фертилността на PET1-цитоплазмата, са важна стъпка към разбирането и манипулирането на механизма на възстановяване на фертилността. Изследването е проведено с линия RHA 325, възстановител на фертилността, с линия HA 342, закрепител на фертилността, както и с представителни извадки от F2 (S1, S2, F1 и F2) потомството на кръстоската HA 342 х RHA 325. В експерименталната работа са включени 11 позитивни бактериални клона (Bac-end секвенции), които са изведени (Hamrit et al., 2008) въз основа на двете съществуващи BAC-библиотеки при слънчогледа (Ozdemir et al. 2004; Clemson University Genomics Institute-http://www.genome.clemson.edu). За обработка и анализ на BAC-end последователностите са използвани програмния продукт BioEdit 7 и базата данни NCBI. В резултат от секвенирането и анализа на идентифицираните положителни BAC-end последователности, са създадени нови маркери. Разработени са два STS-маркера, един CAPS-маркер и един SSR-маркер. CAPS-маркерът BsrG I и SSR-маркерът HRO001 за Rf1 гена, възстановител на фертилността при слънчогледа, са ко-доминантни и могат да бъдат използвани пряко в маркерната селекция.